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產(chǎn)品名稱:

CAL-29細(xì)胞,移行細(xì)胞癌細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-29
CAL-29細(xì)胞,移行細(xì)胞癌細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。

產(chǎn)品概述

CAL-29細(xì)胞,移行細(xì)胞癌細(xì)胞

注意事項(xiàng)如下:

一 、收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、對(duì)于貼壁細(xì)胞,若細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;如細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

三、建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和本公司技術(shù)部溝通交流。

我們?nèi)娜鉃槟?wù),提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,保障售后服務(wù),真心把客戶奉為上帝,及時(shí)處理客戶訂單,全程跟蹤貨源,采用誠信快遞運(yùn)輸,認(rèn)真解答客戶疑問,對(duì)客戶售后問題,不拖沓,不推卸責(zé)任,認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度。

停滯期(Stagnate Phase):細(xì)胞數(shù)量達(dá)飽和密度后,細(xì)胞遂停止增殖,進(jìn)入停滯期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)量不再增加,故也稱平頂期(Plateau)。停滯期細(xì)胞雖不增殖,但仍有代謝活動(dòng),繼而培養(yǎng)液中營養(yǎng)漸趨耗盡,代謝產(chǎn)物積累、pH降低。此時(shí)需做分離培養(yǎng)即傳代,否則細(xì)胞會(huì)中毒,發(fā)生形態(tài)改變,重則從底物脫落死亡,故傳代應(yīng)越早越好。傳代過晚(已有中毒跡象)能影響下一代細(xì)胞的機(jī)能狀態(tài)。在這種情況下,雖進(jìn)行了傳代,因細(xì)胞已受損,需要恢復(fù),至少還要再傳1~2兩代,通過換液淘汰掉死細(xì)胞和使受損輕微的細(xì)胞得以恢復(fù)后,才能再用。結(jié)果反而耽誤了時(shí)間,這是在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)特別注意的。

四、原代培養(yǎng):即*次培養(yǎng),是指將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。有幾方面含義:

培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿(瓶)中就不在分割,任其生長繁殖;

原代培養(yǎng)中的“代”并非細(xì)胞的“代”數(shù),因?yàn)榕囵B(yǎng)過程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞;

原代培養(yǎng)過程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液,也不等于不更換培養(yǎng)器皿。

正常細(xì)胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限,只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無限生長下去。所謂轉(zhuǎn)化即是指正常細(xì)胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細(xì)胞。目前世界上許多實(shí)驗(yàn)室所廣泛傳用的HeLa細(xì)胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)而成。此細(xì)胞系一直延用至今。

原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不易傳下去了,細(xì)胞的生長就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40~50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,在培養(yǎng)過程中其特征始終保持。當(dāng)細(xì)胞株傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。

CAL-29細(xì)胞,移行細(xì)胞癌細(xì)胞

T-47D細(xì)胞,人乳腺管癌細(xì)胞

CCD-1095Sk細(xì)胞,人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞

SK-BR-3*細(xì)胞,人乳腺腺癌細(xì)胞

SW 1353細(xì)胞,人軟骨肉瘤細(xì)胞

GNM 細(xì)胞,人上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞

T6細(xì)胞,人舌癌細(xì)胞

 TSCCA細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞

CAL 27細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞

Tca-8113細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞

TSCCa細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞

CRT 細(xì)胞,人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

U251細(xì)胞,人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SH-SY5Y細(xì)胞,人神經(jīng)瘤細(xì)胞

BE(2)-M17細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

CRL-2268細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

IMR-32細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

SH-5Y5Y細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

SK-N-AS細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

SK-N-BE(2)細(xì)胞,人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

SK-N-MC細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞

A-498細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞

A498-EGFP-puro細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞

ACHN細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞

KC細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞

OS-RC-2細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞

G-401細(xì)胞,人腎癌Wilms細(xì)胞

SK-NEP-1細(xì)胞,人腎母瘤細(xì)胞

SW-13細(xì)胞,人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞

NCI-H295R細(xì)胞,人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞

KP-N-NS細(xì)胞,人腎上腺神經(jīng)母瘤(腦轉(zhuǎn)移)細(xì)胞

NCI-H205細(xì)胞,人腎上腺腺瘤細(xì)胞

786-O(786-0)細(xì)胞,人腎透明癌細(xì)胞

CaKi-1細(xì)胞,人腎透明癌細(xì)胞

CaKi-2細(xì)胞,人腎透明癌細(xì)胞

786-0細(xì)胞,人腎透明腺癌細(xì)胞

ACHN細(xì)胞,人腎透明腺癌細(xì)胞

769-P細(xì)胞,人腎腺癌細(xì)胞

HuTu-80細(xì)胞,人十二脂腸腺癌細(xì)胞

CaES-17細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞

EC9706細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞

Eca-109細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞

KYSE150細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞

TE-1細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞

原代培養(yǎng)是建立各種細(xì)胞系(株)必經(jīng)的階段,其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養(yǎng)技術(shù)和方法、適宜培養(yǎng)基的選擇等多種因素有關(guān)。由于原代培養(yǎng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化性極小,對(duì)病毒敏感性好,因此適應(yīng)制備疫苗等生物制品;但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標(biāo)本、且受供體年齡健康狀況的影響而導(dǎo)致批間差異大等缺陷。目前常用的原代細(xì)胞培養(yǎng)有雞胚成纖維細(xì)胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細(xì)胞。

原代培養(yǎng)的基本過程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種、加培養(yǎng)液、置培養(yǎng)條件下培養(yǎng)等步驟,在所有的操作過程中,都必須保持培養(yǎng)物及生長環(huán)境的無菌。

多數(shù)情況下,分散的細(xì)胞若屬于貼壁依賴型細(xì)胞,就能黏附、鋪展于培養(yǎng)器皿和載體表面生長而形成細(xì)胞單層,這種培養(yǎng)方式稱為單層細(xì)胞培養(yǎng)(monolayer culture),又叫貼壁培養(yǎng)(adherent culture)。少數(shù)情況下,培養(yǎng)的細(xì)胞沒有貼壁依賴性,可通過專門設(shè)備使細(xì)胞始終處于懸狀態(tài)而在體外生長,這種形式稱為懸浮培養(yǎng)(suspension culture)。如何讓接種的細(xì)胞盡快貼壁,是決定培養(yǎng)成功的關(guān)鍵步驟:

取決于適當(dāng)?shù)纳L基質(zhì)表面;

可降低接種后培養(yǎng)液對(duì)細(xì)胞的浮力,如先少補(bǔ)加少量培養(yǎng)液,待細(xì)胞貼壁后再補(bǔ)足營養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);

注意適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種密度,一般105個(gè)/ml左右。

五、傳代培養(yǎng):當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長和細(xì)胞不斷分裂,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會(huì)因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)。這個(gè)過程就稱為傳代(passage)或者再培養(yǎng)(subculture)。對(duì)單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。

體外培養(yǎng)技術(shù)中所謂的傳“代”概念并不等于細(xì)胞生物學(xué)中“親代細(xì)胞”與“子代細(xì)胞”中“代”的概念。傳代培養(yǎng)的實(shí)質(zhì)就是分割后再一次培養(yǎng),可以相對(duì)地衡量培養(yǎng)物的培養(yǎng)年齡。

六、生長曲線:細(xì)胞接種入培養(yǎng)瓶后,先進(jìn)入2-24h的延遲期(lag period),然后進(jìn)入指數(shù)生長期(即對(duì)數(shù)期)(log phase),匯合成單層進(jìn)入緩慢生長或停滯期(即平臺(tái)期)(plateau lhase)。每種細(xì)胞系(cell line)的這些生長期(growth phase)都是特征性的,只要環(huán)境條件保持恒定,每一次測定結(jié)果應(yīng)該是可重復(fù)的。

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