GIBCO10010-147澳洲血源(熱滅活)*
熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。 GIBCO10010-147澳洲血源(熱滅活)* 問:我要做滋養(yǎng)細胞培養(yǎng),Gibco北美胎牛血清要滅活嗎? 答:一般的細胞培養(yǎng)中使用到的Gibco胎牛血清,例如Gibco ES胎牛血清是不用滅活的。如果一定需要滅活,可以直接購買Gibco胎牛血清澳洲熱版本,進口Gibco澳洲胎牛血清熱滅活的一般都已滅活。滅活的Gibco血清價格一般比未滅活的Gibco血清價格要高很多。 關(guān)于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數(shù)實驗室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,因為有兩個作用,*是滅活補體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響。 我在實驗室處理Gibco胎牛血清新西蘭的時候,有一次水浴箱在滅活過程中出現(xiàn)故障,溫度升高到80℃,血清變成了凝膠狀,我重新處理了另外一份Gibco胎牛血清南美,將兩份血清對比,發(fā)現(xiàn)高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時以上,肯定也會對里面的蛋白起到破壞作用。下次有機會我做個延長滅活時間的實驗試試,看看到底有多大的影響。熱滅活之后,血清放在四度冰箱久了,就會有沉淀產(chǎn)生,這常常會被認為是微生物污染或者是黑膠蟲污染。為了驗證到底有沒有污染,常常又會把血清放置37℃溫育,但是血清中的蛋白會進一步析出,后還是要做鏡檢,無菌培養(yǎng)試驗,和革蘭氏染色試驗,非常麻煩。
|